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一、實(shí)驗(yàn)背景
結(jié)膜為一層富有血管的薄而透明的粘膜,覆蓋于眼瞼的內(nèi)面和眼球的前面。按其所在部位分為瞼結(jié)膜,球結(jié)膜和結(jié)膜穹窿。結(jié)膜有助于防止異物和感染對(duì)眼球的損害,但結(jié)膜本身也會(huì)受到化學(xué)物質(zhì)或過敏物質(zhì)的刺激,或受到病毒、細(xì)菌的感染,出現(xiàn)眼痛、眼癢及充血。由于眼結(jié)膜獨(dú)特的韌性,類似于纖維,手動(dòng)研磨通常難以研磨充分;為了提高科研工作者的實(shí)驗(yàn)效率和研究進(jìn)度,本方法采用上海凈信多樣品組織研磨儀,對(duì)樣品進(jìn)行研磨處理,以便于實(shí)驗(yàn)人員可以更好進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),如充分提取RNA、蛋白等。
二、研磨方法
1、實(shí)驗(yàn)步驟:
a,準(zhǔn)備好待研磨的眼結(jié)膜100毫克,干凈并滅菌的2ml鋼罐一套及研磨珠若干,液氮一升;
b,將樣品置于2ml鋼罐中,將其整個(gè)浸入液氮中5mins,然后安裝到上海凈信多樣品組織研磨儀上;
c,設(shè)置研磨參數(shù):頻率為60hz,時(shí)間45s,啟動(dòng)設(shè)備進(jìn)行研磨;
d,待設(shè)備停止運(yùn)行,取出研磨鋼罐。
e,打開鋼罐往里加1ml提取液手動(dòng)混勻。再將樣品轉(zhuǎn)移至2ml離心管內(nèi),進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作。
樣品處理結(jié)果:
樣品研磨前
樣品研磨后
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